日本薬局方において、ヒドロコルチゾンコハク酸エステルの定量法は以下のように規定さ…
日本薬局方において、ヒドロコルチゾンコハク酸エステルの定量法は以下のように規定されている(一部省略)。この定量法に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。定量法 本品及びヒドロコルチゾンコハク酸エステル標準品を乾燥し、その①約50 mg ずつを精密に量り、それぞれをメタノールに溶かし、正確に50 mLとする。この液5 mL ずつを正確に量り、それぞれに内標準溶液5 mL を正確に加えた後、メタノールを加えて50 mL とし、試料溶液及び標準溶液とする。試料溶液及び標準溶液10 μL につき、次の条件で液体クロマトグラフィーにより試験を行い、内標準物質のピーク面積に対するヒドロコルチゾンコハク酸エステルのピーク面積の比 QT 及び QS を求める。ヒドロコルチゾンコハク酸エステル(C25H34O8)の量(mg)= アMS:ヒドロコルチゾンコハク酸エステル標準品の秤取量(mg)内標準溶液:パラオキシ安息香酸ブチルのメタノール溶液(1 →2500)試験条件② 検出器:紫外吸光光度計(測定波長:254 nm)カラム: 内径4 mm、長さ30 cm のステンレス管に10 μm の液体クロマトグラフィー用オクタデシルシリル化シリカゲルを充塡する。カラム温度:25 ℃付近の一定温度移動相:pH 4.0 の酢酸・酢酸ナトリウム緩衝液 / アセトニトリル混液(3:2 )③流量: ヒドロコルチゾンコハク酸エステルの保持時間が約5 分になるように調整する。システム適合性システムの性能: 標準溶液10 μL につき、上記の条件で操作するとき、ヒドロコルチゾンコハク酸エステル、内標準物質の順に溶出し、その イ は9 以上である。システムの再現性:略
- ⑴ 下線部①のように「約」を付けたものは、記載された量の ± 3 %の範囲を意味する。日本薬局方で「約」を付けたものは、記載された量の±10%の範囲を意味します。
- ⑵ ア に入るのは、MS × QT / QS である。内標準法では、ヒドロコルチゾンコハク酸エステルの量=MS×QT/QSで求めます。
- ⑶ 下線部②の検出に用いる光源は、タングステンランプである。254 nmの紫外線の光源には重水素放電管を用います。タングステンランプは可視部の光源です。
- ⑷ 下線部③の移動相中のアセトニトリルの割合を増やすと、ヒドロコルチゾンコハク酸エステルの保持時間は短くなる。逆相クロマトグラフィーでは有機溶媒の割合を増やすと溶出力が強まり、保持時間が短くなります。
- ⑸ イ に入るのは、「理論段数」である。2成分が溶出する順序とともに9以上と規定されるのは分離度です。理論段数は数千などの値で規定されます。
解説
正解は⑵と⑷です。内標準法では、試料と標準品のピーク面積比QT、QSの比に標準品の秤取量を掛けて、量=MS×QT/QSを求めます。逆相系のオクタデシルシリル化シリカゲルカラムでは、移動相のアセトニトリルの割合を増やすと溶出力が強まり、保持時間は短くなります。日本薬局方で「約」は記載量の±10%の範囲、紫外吸光光度計の光源は重水素放電管、システム適合性で9以上と規定するのは分離度です。
出典:厚生労働省ホームページ(https://www.mhlw.go.jp/stf/seisakunitsuite/bunya/0000198923.html)を加工して作成