固定相としてオクタデシルシリル（ODS）化シリカゲル、移動相としてアセトニトリル…
固定相としてオクタデシルシリル（ODS）化シリカゲル、移動相としてアセトニトリルと水の混合液を用いて、ベンゼン、トルエン及びエチルベンゼンの分離を液体クロマトグラフィーにより行った。この分離に関する記述のうち、正しいのはどれか。1つ選べ。
- ⑴ エチルベンゼン、トルエン、ベンゼンの順で溶出する。逆相では疎水性の低い順に溶出するため、ベンゼン、トルエン、エチルベンゼンの順になります。
- ⑵ 理論段高さの値が小さいカラムに変更することにより、各成分間の分離度が向上する。理論段高さが小さいほど理論段数が増えてピークが鋭くなり、分離度が向上します。
- ⑶ 移動相の流速と各成分間の分離係数は比例する。分離係数は保持係数の比で決まり、移動相の流速に比例するものではありません。
- ⑷ 移動相中のアセトニトリルの割合を大きくすることにより、各成分間の分離度が向上する。アセトニトリルの割合を増やすと移動相の溶出力が強まり、保持が減って分離度は一般に低下します。
- ⑸ 固定相にシリカゲル、移動相に n-ヘキサン－アセトン混液を用いても、溶出順は変わらない。シリカゲルとヘキサン系の順相条件では極性に基づく分離となり、溶出順は逆相と異なります。
解説
正解は⑵です。理論段高さ（HETP）が小さいカラムほど同じ長さでの理論段数が多く、ピークが鋭くなるため分離度が向上します。ODS を用いる逆相クロマトグラフィーでは疎水性の低い成分から溶出するため、ベンゼン、トルエン、エチルベンゼンの順に溶出します。アセトニトリルの割合を増やすと溶出が速まり分離度は一般に低下し、順相のシリカゲルカラムでは溶出順が逆になります。
出典：厚生労働省ホームページ（https://www.mhlw.go.jp/stf/seisakunitsuite/bunya/0000198924.html）を加工して作成