ヒトのたんぱく質を医薬品として製造するため、その遺伝子を大腸菌に導入して発現させ…
ヒトのたんぱく質を医薬品として製造するため、その遺伝子を大腸菌に導入して発現させる計画を立てた。組換えDNA技術で用いる操作や酵素に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
- ⑴ 逆転写酵素は、DNAを鋳型として、それに相補的なRNAを合成する酵素である。逆転写酵素はRNAを鋳型としてDNAを合成する酵素です。
- ⑵ 大腸菌に発現させるときは、イントロンを含むヒトのゲノムDNAを組み込んで用いる。大腸菌はイントロンを除くスプライシングができないため、mRNAから逆転写でつくった相補的DNAを用います。
- ⑶ DNAリガーゼは、2つのDNA断片の間の水素結合を切って、断片をつなぎかえる。DNAリガーゼは断片の末端どうしをホスホジエステル結合でつなぐ酵素です。
- ⑷ 制限酵素は、DNAの特定の塩基配列を認識して、その部位で切断する。制限酵素は多くが回文状の短い配列を認識して切断し、目的の遺伝子をベクターに組み込むのに使われます。
- ⑸ ポリメラーゼ連鎖反応では、耐熱性のDNAポリメラーゼを用いて変性・アニーリング・伸長を繰り返す。高温で二本鎖をほどく工程を繰り返すため、熱で失活しないDNAポリメラーゼを用いて目的の配列を増やします。
解説
正しいのは、制限酵素とポリメラーゼ連鎖反応についての記述です。組換えDNA技術では、制限酵素で目的の遺伝子とベクターを切断し、DNAリガーゼでつないで宿主に導入します。ヒトの遺伝子にはイントロンがあり、大腸菌はこれを取り除けないため、mRNAから逆転写酵素でつくった相補的DNAを用います。ポリメラーゼ連鎖反応は耐熱性のDNAポリメラーゼで特定の配列を大量に増やす方法です。
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