2 ポイント法で第1 試薬反応後の吸光度は0.005、第2 試薬反応後の吸光度は…
2 ポイント法で第1 試薬反応後の吸光度は0.005、第2 試薬反応後の吸光度は0.200 であった。検体盲検補正後の吸光度はどれか。ただし、検体量は10 μL、第1 試薬量は230 μL、第2 試薬量は60 μL とする。
- ⑴ 0.192希釈率を逆に見積もり、盲検値を実際より大きく扱って差し引いた場合の値です。第2試薬の添加は盲検の吸光度を小さくする方向に働きます。
- ⑵ 0.196第1試薬反応後の液量240マイクロリットルを第2試薬添加後の300マイクロリットルに換算し、0.005かける240割る300で0.004を求め、0.200から差し引いた値です。
- ⑶ 0.200検体盲検の補正をまったく行わなかった値です。検体自身の濁りや色による吸光度は測定値から差し引く必要があります。
- ⑷ 0.204希釈補正した盲検値を差し引かずに加算してしまった場合の値です。盲検は加えるものではなく引くものです。
- ⑸ 0.208希釈補正を行わないまま盲検値を加算した場合の値で、符号と希釈補正の両方を誤っています。
解説
正解は0.196です。2ポイント法では第2試薬を加えた時点で反応液全体が薄まるため、第1試薬反応後に測った検体盲検の吸光度も、同じ割合で薄まった値に換算してから差し引く必要があります。第1試薬反応後の液量は検体10マイクロリットルと第1試薬230マイクロリットルの合計240マイクロリットル、第2試薬60マイクロリットルを加えた後は300マイクロリットルです。よって補正すべき盲検値は0.005かける240割る300で0.004となり、0.200から0.004を引いた0.196が答えになります。
出典：厚生労働省ホームページ（https://www.mhlw.go.jp/seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/iryou/topics/tp260424-07.html）を加工して作成